The role of MHC haplotypes H2d/H2b in mouse resistance/susceptibility to cyst formation is influenced by the lineage of infective Toxoplasma gondii strain

Toxoplasma gondii strains displaying the Type I/III genotype are associated with acquired ocular toxoplasmosis in humans. Here, we used a mice model to characterize some immunological mechanisms involved in host resistance to infection with such strains. We have chosen the Type I/III strains D8, G2 and P-Br, which cause a chronic infection in mice that resembles human toxoplamosis. Mice deficient of molecules MyD88, IFN-gamma, and IL-12 were susceptible to all three parasite strains. This finding indicates the importance of innate mechanisms in controlling infection. On the other hand, MHC haplotype did not influenced resistance/susceptibility; since mice lineages displaying a same genetic background but different MHC haplotypes (H2b or H2d) developed similar mortality and cyst numbers after infection with those strains. In contrast, the C57BL/6 genetic background, and not MHC haplotype, was critical for development of intestinal inflammation caused by any of the studied strains. Finally, regarding effector mechanisms, weobserved that B and CD8+ T lymphocytes controlled survival,whereas the inducible nitric oxide synthase influenced cyst numbers in brains of mice infected with Type I/III strains. These findings are relevant to further understanding of the immunologic mechanisms involved in host protection and pathogenesis during infection with T. gondii.

Cepas de Toxoplasma gondii que apresentam o genótipo I/III são associadas a toxoplasmose ocular adquirida em humanos. No presente trabalho, nós utilizamos um modelo da doença em camundongos para caracterizar mecanismos imunológicos envolvidos na resistência do hospedeiro à infecção por aquelas cepas. Escolhemos as cepas D8, G2 e P-Br, que causam infecção crônica em camundongos, semelhante à toxoplasmose humana. Camundongos deficientes em MyD88, IFN-G e IL-12 foram susceptíveis a infecções com todas as três linhagens do parasita. Esses dados indicam a importância de mecanismos inatos no controle da infecção. Por outro lado, o haplótipo do MHC não influenciou na resistência/susceptibilidade, na medida em que linhagens de camundongos com um mesmo "background'' genético, mas diferentes haplótipos de MHC (H2b e H2d) apresentam o índice de mortalidade e número de cistos semelhantes após a infecção com aquelas cepas do parasita. Em contraste, o "background'' genético de C57BL/6, mas não o haplótipo de MHC, foi crítico para o desenvolvimento de inflamação intestinal causada pelas cepas estudadas. Finalmente, com relação aos mecanismos efetores, observamos que linfócitos B e T CD8+ controlam a sobrevivência após infecção. Por outro lado, a ativação da enzima óxido nítrico sintase induzida foi um fator importante para controle do número de cistos cerebrais em camundongos infectados com cepas do Tipo I/III. Esses achados são relevantes para o melhor entendimento dos mecanismos imunológicos envolvidos na proteção e patogênese durante infecção com T. gondii.

Liposomes as a carrier for mannophosphoinositide antigens of mycobacteria.

Phosphatidylcholine liposomes have been used as carriers of mannophosphoinositides (PIMs) of mycobacteria to examine their immunological properties. PIMs incorporated in egg phosphatidylcholine (EPC) liposomes elicited both humoral and cell-mediated immune responses in mice. Addition of cholesterol at 43 mole% to PC enhanced the immune responses while the reverse was observed with EPC liposomes bearing negative or positive charge. Liposomes made of dioleoylphosphatidylcholine (DOPC) with cholesterol (43 mole%) proved to be a better immunoadjuvant with this antigen as compared to those made of EPC or dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC). Our results suggest that DOPC liposomes containing cholesterol are better carriers for PIMs-antigen as compared to Freund's incomplete adjuvant.

Relative role of B and T lymphocytes in pathogenesis of a murine herpes virus.

Pathogenesis of a murine herpes virus was investigated in inbred strains (BALB/c, CBA, AKR and C57BL/10) of mice. After intranasal inhalation, virus was found to replicate primarily in the lungs, followed by haematogenous spread to the target organs (adrenal glands and ganglia). AKR (H-2k) were found to be most susceptible to virus infection while CBA (H-2k) mice appeared to be relatively resistant. Infection of B-cell depleted BALB/c mice resulted in detection of lower lung virus titres in B-cell depleted animals as compared to normal intact mice. Moreover, 3 of 12 normal mice in untreated group died of virus infection while deaths did not occur in the B-cell depleted group. Results of T-cell subset depletion experiments in BALB/c mice revealed maximum mortality in the group depleted of both Lyt-2+ and L3T4+ subpopulations. Infectious virus titres were also higher in lungs of T-cell depleted animals.

Allosensitization induced suppression of various murine tumors: role of non-H-2 antigens in antitumor immunity.

Presence of alloantigens on various murine tumors was tested by tumor rejection in allosensitized Swiss mice. The results indicated the presence of alloantigen on immunogenic tumors like chemically induced fibrosarcoma (FS), ascitic sarcoma 180 (S 180) and immunogenic variant of lymphosarcoma (LS-A) in Swiss mice, while these antigens could not be detected by this procedure on spontaneous lymphosarcoma (LS). Allosensitization with skin graft was found to offer quantitatively higher antitumor resistance than the allosensitization achieved by allogeneic lymphocytes. Antitumor effect was not seen when tumor cells were inoculated earlier than day 3 of grafting. Further, host immunosuppression with whole body irradiation up to day of 3 of skin grafting abrogated the antitumor effect. H-2 compatible and non-H-2 incompatible skin graft sensitization of host could offer resistance against both S 180 and LS-A. Further, tumor immune mice rejected H-2 compatible, non-H-2 incompatible skin graft significantly earlier.

Tolerance induction and immunological priming initiated by mucosal contacts with protein antigens in inbred strains of mice

We show that mouse strains differ widely in susceptibility to tolerance induction and/or immunization (priming) following contact of protein antigens (ovalbumin, human or bovine gamma globulins) with different mucosal surfaces. 2. When compared to a control group pretreated with saline, mice pretreated by the oral (intragastric) route with antigen became significantly less responsive to subsequent parenteral immunization (i.e., tolerant). This was observed in most, but not all, antigen/strain combinations. 3.Similar, although less prominent changes were induced by pretreatments with antigen by the ocular (conjunctival) route. 4. No significant effects were following pretreatments by the nasal, vaginal, or rectal routes. 5. Genes present in strains selected for multispecific "high" or "low" responsivencess are included among those involved in tolerance induction following mucosal contacts with protein antigens

Estudo imunopatológico de camundongos de seis diferentes linhagens isogênicas à infecçäo por três tipos de cepas do "Trypanosoma cruzi" / Immunepathologic study of mice of six embread strains infested by three different Trypanosoma cruzi strains

Foi feito um estudo da infecçäo por três diferentes cepas do trypanosoma cruzi em camundongos isogênicos de seis diferentes linhagens com o objetivo de estudar a reposta imunológica humoral e celular e comparar o comportamento das cepas do T. cruzi em linhagens de camundongos geneticamente distintas. As linhagens isogênicas de camundongos foram: A/J,AKR,BALB/c,C3H/He,C57BL/10 e DBA/1. As cepas do T. cruzi classificadas em três tipos de acordo com seus caracteres morfobiológicos, isoenzimáticos e antigênicos foram: cepa Peruana (Tipo I), cepa 21 DF (Tipo II) e cepa Colombiana (Tipo III). O inóculo utilizado em todos os grupos experimentais foi de 100.000 tripomastigotas sangüícolas. Foram utilizados como parâmetros para o acompanhamento da infecçäo: os níveis de parasitemia, os índices de mortalidade e o cálculo da resistência através da édia harmônica da sobrevida, os níveis das fraçöes das imunoglobulinas séricas: IgG1,IgG2a,IgG2b e IgM, avaliados pela técnica de imunodifusäo radial quantitativa; titulaçäo de anticorpos específicos pela imunofluorescência indireta com antígeno específico; teste cutâneocom antígeno específico. Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística aplicando-se a análise da variância para a compara;cäo enter os diversos parâmetros. A associaçäo entre os diversos dados obtidos foi estudade pelo teste da adequaçäo da curva para uma correlaçäo linear. Os animais sacrificados durante o curso do experimento, a partir do 5o.dia de infecçäo para estudo histopatológico. O estado reacional do baço foi avaliado histologicament e pela relaçäo peso baço/peso corporal. A avaliaçäo da resistência das diferentes linhagens através da comparaçäo, pela análise da variância, da média harmônica da sobrevida mostrou que, na infecçäo pela cepa Peruana (Tipo I) näo houve diferença significante entre as várias linhagens sendo todas muito susceptíveis a este tipo de cepa. Na infecçäo pela cepa de Tipo II (21 SF) a linhagem AKR é extremamente susceptível e a B10 muito resistente. As demais formam um espectro bem definido quanto à susceptibilidade que difere do espectro que se apresenta à infecçäo pela cepa de Tipo III (Colombiana). Nesta última os animais DBA säo os mais resistentes e os A/J os mais susceptíveis. Comparando-se a infecçäo pelas cepas de Tipos II e III, verifica-se que, com exceçäo da linhagem AKR, as outras säo mais resistentes à infecçäo pela cepa 21 SF do que pela Colombiana. Os níveis de parasitemia variam conforme a linhagem do camundondo porém o perfil da curva parasitêmica é característico par o tipo de cepa empregado, mantendo-se constante, independentemente da linhagem. Entre os animais das linhagens mais resistentes há uma correlaçäo entre o maior grau de resistência e os menores níveis parasitêmicos, à infecçäo com as cepas 21 DG e Colombiana. Esta correlaäo näo é entretanto observada entre os animais mais susceptíveis podendo-se observar animais com alta taxa de mortalidade e com uma média parasitêmica baixa. O oposto também pode seer observado em que algumas linhagens resistentes podem apresentar níveis elevados de parasitemia e elevada sobrevida...